上海延慕实业有限公司

https://fanketech.biomart.cn

公众号

扫一扫
进入手机商铺

产品分类
公司荣誉
公司图片
联系方式
 公司地址
上海市浦东新区川沙镇5245弄
邮编:201200
 联系电话
登录查看商家电话
 传真号码
021-50760790
 电子邮箱
fankesw@****com登录查看商家邮箱
 公司网址
http://www.ym-sw.com
点击这里给我发消息
公司新闻

一抗的选择要点和技巧,必看!

发布时间:2021-09-08 09:57 |  点击次数:

  免疫组化实验是一种很严密的实验,对抗体的选择哪也有很高的要求,免疫组化所有的抗体主要是一抗,如何选择免疫组化中的一抗?下面我们就来了解下。

  (1)选择单克隆还是多克隆抗体。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体,单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合,就象dao弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中,一般单克隆抗体特异性强,但亲和力相对小,检测抗原灵敏度相对较低;而多克隆抗体特异性稍弱,抗体的亲和力强,灵敏度高,但易出现非特异性染色(可以通过封闭等有所避免)。

  (2)种属来源。一般家兔来源的抗体多是多克隆;而小鼠来源的抗体多是单克隆,但也有另外。这条主要要与后面的二抗来源相匹配。

  (3)实验目的是检测什么种属的抗原,即species reactivity。这一点很重要,一般说明书上都有注明,如小鼠Ms、大鼠Rat、人Hum等等。

  (4)能否做免疫组化。一般一抗说明书都会注明做WB、IHC、ICC、IF等,建议最好选择注明的抗体,因为一般都是经过文章证明。

  (5)检测标本类型。用于检测石蜡切片还是冰冻切片,一般能做石蜡切片的抗体,可能都可以用来检测冰冻切片,但能做冰冻切片的抗体,不一定能检测石蜡切片中的抗原。

  (6)生产厂家。国外着名抗体生产商原装抗体质量一般没问题,但有点贵;而国内分装厂家用的一抗工作液,价格便宜,但有时结果的稳定性和重复性稍差,尤其不同批次重复性较差。

  (7)价格与质量的矛盾。一抗原装质量可能会好点,因为许多一抗避免反复冻融,且在稀释液中稳定性较差(若时间长),但价格较贵。