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悬浮细胞不易转染怎么办?

发布时间:2021-08-19 11:28 |  点击次数:

  悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
 


  目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。

  为了提高悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如engreen的Entranster试剂,纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,最好选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到最低,如Entranster-E。

  悬浮细胞不易转染,选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。