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樊克生物讲解"特殊染色液"

发布时间:2019-05-05 10:44 |  点击次数:

      特殊染色和组织化学染色是病理学研究的技术之一,也是临床病理诊断中常用的相关诊断技术。虽然随着免疫组织化学技术的发展,逐步代替了许多特殊染色和组织化学技术,但是由于特殊染色具有简单、快速和成本低的特点而一直被应用,而且许多特殊染色是免疫组织化学技术不能替代的。

 

1基本理论
1.1特殊染色的概念
为了显示特定的组织结构或组织细胞特殊成分,用特定的染料和方法对组织切片进行染色,称为特殊染色,通常指除HE染色外的所有染色方法。特殊染色是普通染色的必要补充,也是染色技术中不可缺少的部分,在病理诊断中具有十分重要的辅助作用。
1.2特殊染色的意义

特殊染色是普通染色的必要补充,是染色技术不可缺少的部分。选用恰当的特殊染色方法,显示或进一步确定病变性质、异常物质以及病原体,对于疾病的诊断和鉴别诊断具有十分重要的作用。在实际工作中,一般是先做HE染色,通过对切片认真细致地观察,仍不能做出正确的诊断,或鉴别诊断有困难时,再进行特殊染色。通常将特殊染色用于肿瘤的诊断和鉴别诊断,如应用网状纤维染色可以区别癌与肉瘤。虽然特殊染色具有十分重要的临床价值,但它不能取代普通染色,而只能作为普通染色的辅助诊断手段。

 

1.3特殊染色的分类
特殊染色方法的种类很对,一般根据所染对象的不同,分为结缔组织染色、肌组织染色、神经组织染色、脂质染色、糖类染色、色素类染色、病理内源性沉着物染色、病原微生物染色、内分泌细胞染色等。
2具体实践
1.1特殊染色的一般原则
1.1.1制片室布局合理
制片室的合理设置和染色的其他准备工作,都是保证组织切片染色质量的必要条件。制片室常规设置应科学,室内布置应合理,便于操作,染片台(架)和试剂柜、各种器皿和染色所需的其他物品必须齐全。
1.1.2严格遵循操作常规
大多数的组织切片需经过固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、脱蜡等步骤,在进行染色;部分直接经冷冻切片染色。这些步骤是否严格按照要求进行,将直接影响染色的效果。一张固定、脱水、浸蜡等步骤有缺陷的切片,不可能达到颜色鲜艳、组织透明、层次清晰的效果。
1.1.3灵活应用染色技术

染色过程中,既要遵循染色操作规程,又要灵活应用特染技术。当染色效果不佳时,应认真进行分析,及时找出原因,根据实际情况,恰当调整染色剂的浓度、染液的pH、染色时间和环境温度等。在每一个必要的环节上,要坚持用镜检来监控染色程度,在染色完成后,还必须在显微镜下检查切片的染色是否达到要求。

1.2特殊染色的常见问题与对策
1.2.1固定液和切片类型的选择
1.2.1.1固定恰当  应根据染色方法确定固定液。不同的染色方法,使用的固定液不尽相同,一般选用4%中性甲醛固定液,一些特染方法需要选用特殊的固定液。含汞固定液固定的组织,染色前需经脱汞处理。
①脱汞盐结晶  用含有sheng汞的固定液(如Zenker氏液或Helly氏液)固定的组织,容易产生棕黄色晶体状汞盐沉淀物,染色前必须除去汞盐结晶,才能进行染色。
②脱甲醛色素  使用劣质甲醛固定或在高温下用甲醛固定较久,组织内容易产生黑色或棕色的色素(称为甲醛色素),这一现象以肝、脾、肺等脏器尤甚。
③脱苦wei酸着色  用苦wei酸或含苦wei酸的Bouin氏液或Gendre氏液固定的组织,被苦wei酸着色而显黄色。
④脱黑色素  黑色素是一种正常的色素多见于眼、皮肤的黑色素细胞,在机体的疾病中易产生异常的黑色素,经过染色能够清楚地被显示出来。