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血液样本采集与淋巴细胞提取

发布时间:2019-04-09 16:21 |  点击次数:

一、《细胞及血液样本采集操作指南》(gDNA)培养细胞1. 培养细胞用细胞瓶,须加满培养基后,常温运输。血液1. 已加入抗凝剂(选择用 EDTA-、柠檬酸-、ACD 等抗凝,不要用肝素抗凝)的新鲜 全血,常温运输。 注意事项 1. 我们不接收裂解的细胞样本以及全血样本。
2. 所有样本均应标明准确的样本编号,同时配有一张样本登记表,写明样本名称、 种类、编号、取样日期、样本处理情况等。
二、《组织样本采集操作指南》(gDNA)(1)动物组织1. 首先准备好用于包装样本的铝箔或冷冻保存管,并且用油性记号笔在铝箔或冻存 管外表多处写明样本编号。2. 准确切除所需组织后,立即剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织类型。 3. 在生理盐水中迅速漂洗样本,以去除血渍和污物。4. 用准备好的铝箔或冷冻保存管装载包裹组织,迅速投入液氮冷却。5. 填写样本登记单,写明样本名称、组织类型、编号、取样日期、样本处理过程等 情况。
(2)临床标本1. 准确切除所需组织后,立即投入液氮冷冻。2. 用准备好的铝箔或冷冻保存管装载包裹组织。3.样品操作最好在冰上进行。4. 填写样本登记单,写明样本名称、组织类型、编号、取样日期、样本处理过程等情况。(3)植物组织1. 准确取得所需组织后,立即用准备好的铝箔包裹组织。2. 立即投入液氮冷冻。3. 填写样本登记单,写明样本名称、组织类型、编号、取样日期、样本处理过程等 情况。(4)注意事项1. 如用液氮罐存放样品包裹组织的铝箔或冷冻保存管转入样本袋时,请按以下步 骤进行:把样本袋(纱布袋等)放入液氮中冷冻一下,而后将液氮冷却的组织放 入样本袋(每个样本袋只保存同样的组织,样本较多时应分装至多个小袋,不要在一只样本袋中放过多的样本以防无法放入液氮罐或无法从液氮罐中取出) 袋口 , 留一根编号绳,绳上粘 2 张标签纸(标签上注明:客户名、样本名称、编号、日 期,粘 2 张标签纸是为了防止标签脱落造成样本混乱) ,迅速转入液氮罐。2. 如用广口容器液氮暂存建议用进口高质量冻存管,油性笔标记后,样品迅速 放入管中,拧紧后迅速放入液氮中。然后再转移到超低温冰箱中保存。3.直接干冰中保存并邮寄的建议全部用进口冻存管,油性笔标记后,样品迅速放 入经干冰预冷的冻存管中,放入样品袋,埋入干冰中,密封包装后,运输。 对于液氮保存样品,务必注意: 不要用 Eppendorf 管,因为 Eppendorf 管从液氮中取出时极易发生管子爆裂而造成 样本损失。 不要用国产冻存管, 因为国产冻存管从液氮中取出时也常发生爆裂, 可能造成样品 损失或伤人。

三、《基因组 DNA 样本采集操作指南》(gDNA)基因组 DNA 1. 如果提供基因组 DNA 样本, 要求电泳条带清晰, 没有拖尾, 浓度大于等于 50ng/μl, OD260/280 在 1.8 左右。  

四、样本量1. 2. 3. 4. 5. 对于正常未经特殊处理的培养细胞,细胞量要求至少 1*107。 正常人抗凝血液样本,体积 0.5ml 以上。 新鲜正常组织,25mg 以上。 基因组 DNA 总量 1 微克以上。 对于癌症或经过特殊处理的样本,要求量以实际抽提量为准。强烈建议 为确保实验的顺利, 我们强烈建议您在取样时, 应同时备份 2~3 份, 如备份 3 份, 则送给我们两份,如果备份 2 份,则送样一份,您自己留一份,以防备部分样品 降解,重新取材或送样将耽误您的时间。即使样品全部合格,备份的样品您还可 以用来进行其他方面的实验(如定量验证,蛋白方面,生化方面的实验等) 。 备份又分为两种,一种为严格备份,即:样品取下后一分为二,这样的两份样品 基本上具备 同性质。另一种为非严格备份,即生物学重复的样品,这样的备份样品同质性要 较前者差。

注意事项
1. 如用液氮罐存放样品包裹组织的铝箔或冷冻保存管转入样本袋时,请按以下步 骤进行:把样本袋(纱布袋等)放入液氮中冷冻一下,而后将液氮冷却的组织放 入样本袋(每个样本袋只保存同样的组织,样本较多时应分装至多个小袋,不要在一只样本袋中放过多的样本以防无法放入液氮罐或无法从液氮罐中取出) 袋口 , 留一根编号绳,绳上粘 2 张标签纸(标签上注明:客户名、样本名称、编号、日 期,粘 2 张标签纸是为了防止标签脱落造成样本混乱) ,迅速转入液氮罐。
2. 如用广口容器液氮暂存建议用进口高质量冻存管,油性笔标记后,样品迅速 放入管中,拧紧后迅速放入液氮中。然后再转移到超低温冰箱中保存。
3.直接干冰中保存并邮寄的建议全部用进口冻存管,油性笔标记后,样品迅速放 入经干冰预冷的冻存管中,放入样品袋,埋入干冰中,密封包装后,运输。 对于液氮保存样品,务必注意: 不要用 Eppendorf 管,因为 Eppendorf 管从液氮中取出时极易发生管子爆裂而造成 样本损失。 不要用国产冻存管, 因为国产冻存管从液氮中取出时也常发生爆裂, 可能造成样品 损失或伤人。